第(2/3)页 · 合并提取液,减压浓缩至无醇味,得浸膏。 · 除多糖/蛋白质: · 加入3-4倍体积95%乙醇沉淀多糖,静置后离心取上清。 · 或用Sevage法(氯仿:正丁醇=4:1)去除蛋白质。 --- 3. 黄酮的纯化 液液萃取法 · 用乙酸乙酯或正丁醇萃取水相中的黄酮(黄酮苷元更易溶于乙酸乙酯,苷类偏向正丁醇)。 · 重复3-4次,合并有机相,减压浓缩。 柱层析法(关键步骤) · 吸附剂选择: · 聚酰胺柱:适合黄酮(氢键吸附),用30%-95%乙醇梯度洗脱(如先水洗去糖,再用50%乙醇洗黄酮)。 · 硅胶柱:对黄酮苷元效果好,洗脱剂用氯仿-甲醇梯度(如10:1→5:1)。 · 大孔树脂(如AB-8、D101):先水洗去糖,再用30-70%乙醇洗脱黄酮。 · 操作要点: · 上样量不超过柱体积的1/10,流速1-2 BV/h。 · 分段收集,通过TLC(硅胶G板,展开剂:乙酸乙酯-甲酸-水=8:1:1)或HPLC监测目标成分。 重结晶 · 对纯度较高的部分,可用甲醇-水或乙醇-乙酸乙酯混合溶剂重结晶。 第(2/3)页