第(3/3)页 --- 4. 鉴定与验证 · 显色反应: · 盐酸-镁粉反应(橙红色)、AlCl3反应(黄色荧光)初步确认黄酮。 · HPLC/MS: · 对照品比对(如芦丁、槲皮素等),或通过质谱分析分子量及结构。 · UV光谱:黄酮类在250-280nm(Band II)、330-380nm(Band I)有特征吸收。 --- 注意事项 1. 避免氧化:提取过程避光、氮气保护,尤其对含酚羟基的黄酮。 2. 梯度优化:柱层析时需预试验确定最佳洗脱比例。 3. 得率与纯度平衡:高纯度可能损失得率,需根据需求调整(如药用需≥95%)。 4. 中试放大:若工业化生产,需优化溶剂回收、树脂再生等成本问题。 --- 示例流程(简化版) 黄精粉→70%乙醇回流→浓缩→AB-8树脂(水洗→50%乙醇洗)→浓缩洗脱液→聚酰胺柱(水→30%乙醇)→冷冻干燥→黄酮组分(纯度可达80%以上)。 通过上述方法可高效分离黄精黄酮,后续可结合制备型HPLC或结晶进一步提高纯度。 第(3/3)页